卵细胞体外成熟怎么做到
卵母细胞(oocyte)体外成熟技术(in vitro maturation,IVM)是一项新的辅助生殖技术,具有能减少常规促排卵药物引起的不良反应、减少卵巢过度刺激综合征(ovarian hyperstimulation syndrome,OHSS)、降低治疗费用等优点,较传统的体外受精(IVF)技术容易被患者接受。其操作简单地讲就是,将卵巢中的未成熟卵取出,采用特殊的培养液模拟体内的卵泡微环境,将卵子在体外培养,待其成熟后,进行显微授精,等授精卵发育成熟,再植入母体子宫腔内。
早在1935年,人们就观察到兔未成熟卵母细胞在普通培养基中培养可自动成熟。由此提出卵母细胞可自发性核成熟这一观点。在小鼠、绵羊、猪、恒河猴和人的卵泡培养中,进一步证实了这一概念。1991年,Chian等才开始真正意义的IVM的临床应用研究。1994年,Trounson等证实了多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)患者的未成熟卵母细胞具有体外成熟及受精发育的能力。同年,卵母细胞IVM后行卵母细胞浆内单精子注射(ICSI)也获得成功。多囊卵巢综合征是引起不孕的常见原因,据统计在育龄妇女中的发病率为5﹪~10﹪。在PCOS患者的超排卵过程中,经常出现一种情况是对促排卵药物不敏感,如对低剂量促性腺激素长时间不反应,对氯米芬抵抗而导致卵泡得不到发育或生长时间过长与内膜不同步,不能妊娠;另一情况是在一定促性腺激素作用的情况下产生过激反应诱发OHSS,以致威胁患者的生命。卵母细胞IVM为人们解决这些问题提供了一条可供选择的途径,且研究证明,PCOS患者比正常卵巢者获得更多的未成熟卵。因此认为,卵母细胞IVM对PCOS患者治疗尤其适用。
如何验证体外培养出的卵细胞的功能完整性
如何验证体外培养出的卵细胞的功能完整性
不同动物排卵排出的卵细胞的时期不同 没有到减二中期需要培养到减二中 本身就是减二中期的就可以直接受精 卵原细胞采集可以从屠宰场买卵巢 也可以直接通过激素让动物超数排卵再通过冲卵获取卵细胞 使用促性腺激素让母牛超数排卵排出的是初级或次级卵母细胞,需在体外培养到减二中期才能参与受精. 有的要有的不要。
卵母细胞(oocyte)体外成熟技术(in vitro maturation,IVM)是一项新的辅助生殖技术,具有能减少常规促排卵药物引起的不良反应、减少卵巢过度刺激综合征(ovarian hyperstimulation syndrome,OHSS)、降低治疗费用等优点,较传统的体外受精(IVF)技术容易被患者接受。其操作简单地讲就是,将卵巢中的未成熟卵取出,采用特殊的培养液模拟体内的卵泡微环境,将卵子在体外培养,待其成熟后,进行显微授精,等授精卵发育成熟,再植入母体子宫腔内。
15、体外受精,采集的卵母细胞都需要在体外进行培养成熟吗?
卵母细胞的采集一般有三种方法:第一,对实验动物小鼠、兔和小家畜猪、羊等卵母细胞采集时,可先用促性腺激素处理,使其排出更多的卵子,然后在适当的时间从输卵管冲取卵子,并使其直接与获能的精子在体外受精。第二,从刚屠宰的雌性动物体内摘取卵巢,再从卵巢中采集卵母细胞。第三,直接从活体动物的卵巢中采集卵母细胞,叫活体采卵。需借助超声波探测仪、内窥镜或腹腔镜,直接从活的动物卵巢中吸取卵母细胞。后两种方法适用于大家畜和大动物,卵母细胞是从卵巢中采集的,需在体外培养成熟后才能与获能的精子受精。第一种方法是从输卵管内取的卵母细胞,此时的卵母细胞已经是成熟的可以直接与获能的精子受精的,所以不需要再进行成熟培养。但超数排卵的关键是掌握卵子进入输卵管和卵子在输卵管中维持受精能力的时间,一般要求在卵子具有旺盛受精能力之前冲取。